產(chǎn)品名稱: 谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Glutamic Acid(Glu) Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC1580           產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：360
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡要介紹：
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH₄⁺，引起340nm處吸光度的上升，通過測定340nm吸光度的變化，計算谷氨酸含量。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存，臨用前加入40mL試劑一；
試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存，臨用前加入2.5mL 試劑二；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體0.5mL×1支，4℃保存。10μmol/mL 谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)品。
產(chǎn)品說明：
Glu廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH₄⁺，引起340nm處吸光度的上升，通過測定340nm吸光度的變化，計算谷氨酸含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
操作步驟：
一、谷氨酸提取
細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品：收集細(xì)胞或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每1000萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），10000rpm，常溫離心10min，取上清待測。
稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一進行冰浴勻漿，10000 rpm，常溫離心10min，取上清待測。
二、測定步驟

1. 紫外分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長340nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

將標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋為2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078、0.039μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3. 在1 mL石英比色皿中加入下列試劑：

（1）標(biāo)準(zhǔn)管：在1 mL石英比色皿中加入200μL標(biāo)準(zhǔn)溶液、800μL試劑三和50μL試劑四混勻，立即記錄340nm處20s時的吸光值為A1和5min20s時的吸光值A(chǔ)2，計算?A=A2-A1。
（2）測定管：在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本、800μL試劑三和50μL試劑四混勻，立即記錄340nm處20s時的吸光值為A1和5min20s時的吸光值A(chǔ)2，計算?A=A2-A1。
三、谷氨酸含量計算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以谷氨酸含量（µmol/mL）為x軸，標(biāo)準(zhǔn)管?A為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b。將測定管?A帶入方程得到x值。
2、氨基酸含量計算：
（1）按照蛋白濃度計算
谷氨酸含量（µmol/mg prot）=x×V樣本÷（Cpr×V樣本）=x÷Cpr。
（2）按照樣品質(zhì)量計算
谷氨酸含量（µmol/g鮮重）=x×V樣本÷（W÷V樣總×V樣本）=x÷W。
（3）按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計算
谷氨酸含量（μmol/10⁴ cell）＝x×V樣本÷（1000÷V樣總×V樣本）=0.001x。
V樣總：加入提取液體積，1mL；V樣本：加入的樣本體積，0.2mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；1000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，1000萬。
注意事項：
為提高檢測靈敏度，測定管的吸光值應(yīng)小于1且?A小于0.4，若大于此值則需要將上清液用試劑一稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測定。

谷氨酸(Glu)含量檢測試劑盒

相關(guān)文獻：
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang，Chengzhen Liang，Zhigang Meng，Yanyan Li，Muhammad Ali Abid，Muhammad Askari，Peilin Wang，Yuan Wang，Guoqing Sun，Yongping Cai，Shou-Yi Chen，Yi Lin，Rui Zhang，Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: